①②③④⑤⑥⑦疫情“侦察兵”的
时刻
新型冠状病毒的样本如何开展检测?怎样保证样本检测的准确性?近日,记者走进市疾控中心新型冠状病毒检测实验室,探访贵港市新冠肺炎疑似患者和确诊病例病毒样本的检测过程。
“每一次检验都必须做到三级防护”
进入实验室之前,必须全副武装:以三级防护标准,戴上N95医用口罩,确保用力呼气时口罩四周不漏气;戴上普通一次性手套、丁腈乳胶手套、医用头罩;双脚、双手、躯干、头部逐步套入防护服内,小心翼翼拉上、固定拉链,全程不能让防护服与外物有任何接触;将丁腈乳胶手套套住防护服衣袖,确保身体与空气无直接接触;戴上护目镜,套牢防护服头部四周;戴上鞋套,套住防护服裤脚……
在市疾控中心病毒科科长刘作军的现场指导下,记者穿戴并检查好所有的防护用具需要10多分钟,整个身体被捂得严严实实,呼吸变得不顺畅,护目镜仅几分钟就起雾了。
“每一次检验,都必须确保三级防护到位。”刘作军告知注意事项后,带着记者一同进入实验室。
穿过防护门、缓冲区,再次消毒手套、鞋底等部位后,记者终于进入实验室内部第一个分区——样品处理室。此时,同样全副武装的检验技师覃馨满和钟少娟正忙着接收刚从桂平市疾控中心送来的生物安全运输箱,箱里装着一批送检样品。
覃馨满小心翼翼拧着样品试管顶部,对照送检清单认真核对试管上的采集信息。钟少娟则忙着检查样品试管情况,逐条逐项登记标本种类、来源、数量等信息,对模糊信息的样品进行标记、备注,以便于及时反馈给送检单位、再次确认。
“接收过程有一点差错,都可能产生严重影响。”覃馨满告诉记者,不论昼夜,随时会收到各县市区的送检样品。每天类似这样的接收流程最少要做15次,每批送检样品几十上百支不等,必须按要求及时接收、检测。
“每次接收完病毒样品,如果符合立即检测条件,则马上安排检测。否则先妥善保存,随后及时检测。”刘作军拉开样品处理室的新冠病毒标本保存专用冰箱,里面分格分类保存着阳性标本和阴性标本,而阳性标本试管装着的正是此次疫情的“罪魁祸首”。
“最危险的步骤是新冠病毒核酸提取”
检测病毒样本是“确诊”和“疑似”的一道分水岭,极为敏感又至关重要。
和样品处理室紧挨着的是产物分析室,防护门上贴着新冠病毒检测流程。检测技师可以通过防护通道从产物分析室直通PCR室,病毒标本、登记记录等则须通过各功能室夹层墙壁间的安全通道交互。
产物分析室里最显眼的是两台生物安全柜,这是防护检测人员的关键仪器。覃馨满认真检查登记样品接收记录后,在生物安全柜内核对样品及编号,接着双手在安全柜内小心翼翼提取病毒样本、进行分离。钟少娟利用另一台生物安全柜,一丝不苟地给提取板里的病毒标本配制检测试剂,核对后再将提取板传入PCR室。
“最危险的步骤是新冠病毒核酸的提取,这个过程可能形成气溶胶,如果防护不当或者操作失误,被感染的风险很高。”刘作军介绍,检测的每一个步骤都必须十分谨慎,不但要求有丰富的工作经验,还必须足够细心,必须精神高度集中。配制检测试剂时,如果手指触碰试管底部,仅仅一两秒就可能致使溶媒失活,造成实验失败。
“将病毒核酸放大几千万倍”
核酸提取后,还要加样上机检测,通过荧光定量PCR核酸扩增仪检测出数据,然后进行比对、分析,期间不能出现一点纰漏。
“每次实验至少需要两名检验技师相互配合。”在PCR室,刘作军将配好的提取板小心谨慎地放入荧光定量PCR核酸扩增仪内。“相当于将病毒核酸放大几百万甚至几千万倍,扩增观察,从而确定样本是否被病毒感染。”
经过一个多小时的耐心等待,这一批核酸样本的检测数据终于反馈到PCR室电脑。刘作军将每一份送检样品检测数据,通过对比病毒通用特性数据和新冠病毒特性数据,一一进行阴性对照和阳性对照。
“不同的靶标根据对应阴性调整基准阈值。”对部分不易判读的检测数据,刘作军和同事认真进行现场分析,有针对性地进行判读。如果样品检测数据呈阳性或可疑,必须重新用另外两种试剂,分别按照检测步骤严格复核,直至靶基因检测判读结果明确。
“滴水不漏做好检测和防护”
检验技师做完结果分析报告,按要求报告检测结果后,即完成这一轮病毒样品的检测工作。
出了病毒检验实验室,防护用具必须按穿戴顺序的倒序过程脱下,期间也不能触碰任何外物。防护服密不透风,整个人就跟从桑拿房里出来一样。记者的护目镜里层布满了水珠,耳朵被勒得火辣辣的,脸上被勒出块块印痕。
“每做一次检验,从实验环境准备、个人防护、核酸提取、实验扩增、结果分析到检测结束,最少需要两三个小时。这段时间内,我们不能喝水,也不能上厕所。”刘作军脱下防护服,衣服已经湿透。为了及时完成样品检测,他吃住都在办公室。
样品采集、运输、保存不当,试剂运输、保存、配置不当都可能影响实验结果。如果实验室污染、试剂污染、样品交叉污染,可能出现假阳性结果。刘作军介绍,为了确保人员安全和检测质量,实验室每天最少进行一次全覆盖清洁和消毒,并用紫外灯长时间消杀。每次做完实验,都要对生物安全柜等重点仪器和工作区消毒。此外,每次检测完毕,还要严格处理各种废弃物,及时对已检样品进行高温灭菌,每天定时送往医疗废弃物处理公司集中处理。
“目前正处于疫情防控最吃劲的关键阶段,病毒检测工作既要紧锣密鼓,又要时刻绷紧神经,否则就可能会前功尽弃。”刘作军表示,目前,实验室24小时持续接样、检测,后续会随着样本量的变化及时调整工作状态,保证检测不积压,在最短的时间内完成检测。
本报首席记者徐智坚记者张庆杰摄影报道
①刘作军从专用通道拿出病毒提取板,准备放到荧光定量PCR核酸扩增仪将病毒核酸放大观察。
②检测技师在生物安全柜内核对送检样品信息。
③刘作军在检查样品试管情况。
④每次实验至少需要两名检验技师相互配合。
⑤检测技师在安全柜内提取病毒样本。
⑥刘作军小心翼翼拉开新冠病毒标本保存专用冰箱,准备存放标本。
⑦刘作军和同事在PCR室对比分析样品检测数据,进行检测结果判读。
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